纯蒸馏水中的DNA在室温下就会变性,为什么

来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/05/24 05:33:27

每一个核苷酸的磷酸基上都带有一个负电荷。如果这些负电荷没有被中和,双链之间的这种强有力的静电排斥作用将驱使两条链分开(在同一条链内虽然也存在着这种静电斥力,但由于链内的共价键,这种静电斥力并不重要)。但是当有盐类加入时,这些带负电荷的磷酸基团可以被正离子(如Na+)所中和,也就是正离子围绕在磷酸基周围形成了"离子云",有效地屏蔽了磷酸基之间的静电斥力。这就是Debye-Hvckel 离子屏蔽理论。在生理盐浓度(约0.2mol/L)时就发生了这种屏蔽作用.斥力也被中止。当离子浓度降低时,这种屏蔽作用减弱,斥力增大,因而Tm值随之降低。事实上.纯蒸馏水中的DNA在室温下就会变性,也就是这个缘故。在超过生理盐浓度时,Tm值仍然随着离子强度的增加而上升,这是因为在高盐浓度下碱基的溶解性降低而增加了疏水作用力,促进了双螺旋结构的稳定。

每一个核苷酸的磷酸基上都带有一个负电荷。如果这些负电荷没有被中和,双链之间的这种强有力的静电排斥作用将驱使两条链分开(在同一条链内虽然也存在着这种静电斥力,但由于链内的共价键,这种静电斥力并不重要)。但是当有盐类加入时,这些带负电荷的磷酸基团可以被正离子(如Na+)所中和,也就是正离子围绕在磷酸基周围形成了"离子云",有效地屏蔽了磷酸基之间的静电斥力。这就是Debye-Hvckel 离子屏蔽理论。在生理盐浓度(约0.2mol/L)时就发生了这种屏蔽作用.斥力也被中止。当离子浓度降低时,这种屏蔽作用减弱,斥力增大,因而Tm值随之降低。事实上.纯蒸馏水中的DNA在室温下就会变性,也就是这个缘故。在超过生理盐浓度时,Tm值仍然随着离子强度的增加而上升,这是因为在高盐浓度下碱基的溶解性降低而增加了疏水作用力,促进了双螺旋结构的稳定。

事实上,平时制备的DNA也总是DNA的钠盐,每个磷酸基总是结合一个Na+在用Nacl和CsCl测量DNA分子量时,就会得到不同的数值,二者之比为0.75。因为单核苷酸的平均分子量为330,若是钠盐则为353,若是铯盐则为467。353/467=0.75。这就是一个有力的证据。
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