脱乙酰度

壳聚糖的游离氨基测定及脱乙酰度的计算

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中国食品产业网 （2007年3月13日17:14）

1 范围

本方法适用于红曲米、红曲红、红曲发酵液和功能性红曲中桔青霉素的测定。

2 原理

试样中的桔青霉素经提取、净化及浓缩后, 根据在高压液相色谱上的出峰面积测定含量。

3 试剂

3.1 乙腈：HPLC级；

3.2 磷酸：分析纯或色谱纯；

3.3 甲醇：HPLC级；

3.4 甲苯：分析纯；

3.5乙酸乙酯： 分析纯；

3.6甲酸：分析纯；

3.7水：去离子水

3.8乙醇：色谱纯

3.9桔青霉素标准溶液:：准确称取桔青霉素标准品（美国Sigma公司），用甲醇溶解，制成500 mg/L的储藏液， 工作液稀释到100mg/L，置4°C冰箱中备用。

3.10高压液相色谱洗脱剂：乙腈-去离子水（用色谱纯磷酸调pH至2.5）[35+65，v/v]

4 仪器

4.1 高效液相色谱仪；

4.2色谱柱：Eclipse XDB C18反相色谱柱，250 × 4.6mm, 粒度直径为5μm；

4.3试样环：20μL；

4.4检测器：荧光检测器，λex=331，λem=500；

4.5 VCX 400超声波细胞破碎仪；

4.6电子天平：千分之一或万分之一；

4.7 pH计：精度为0.01；

4.8匀浆器；

4.9离心机；