DNA连接酶主要是从原核生物中分离得到的

不对，现在医学和科研所用的DNA连接酶主要是从病毒（T4噬菌体）中分离得到的，当然也有很多从原核生物（大肠杆菌）分离得到的。但病毒，大肠杆菌和动植物细胞中都有DNA连接酶。
能将两段DNA拼接起来的酶叫DNA连接酶。该酶催化DNA相邻的5′磷酸基和3′羟基末端之间形成磷酸二酯键，使DNA单链缺口封合起来。
为将限制性酶切片段共价地连接起来，主要使用T4DNA连接酶，或大肠杆菌连接酶。 T4DNA连接酶是分子量68kD的多肽，是T4噬菌体感染大肠杆菌而产生的。在连接反应中以ATP为辅助因子，是应用最广的连接酶，有商品供应。它的用途有：①连接带匹配粘端的DNA分子，②使平端的双链DNA分子互相连接或合成的接头相连接。大肠杆菌DNA连接酶能使互相匹配的5′突出端和3′突出端的双链DNA连接，反应中以NAD+作为辅助因子，基因工程中不常用。

应该没错
限制性内切酶，DNA连接酶都是从细菌中分离出来的

不对……一般都是用T4噬菌体的DNA连接酶……同意楼上的说法

对的