求教 分光光度计中不同比色皿厚度之间吸光度的换算问题

来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/05/12 18:40:29
大虾们好:
最近作试验时遇到一个小问题,在利用分光光度法测定茶氨酸 含量时,标准方法是利用的0.5的比色皿由于试验条件限制,我是利用的1cm de 比色皿,不知道这样做会不会影响试验结果,该怎换算 谢谢

比色皿厚度依照比耳定律可知吸光度与浓度、光径成正比,故增加光径相对可提高一定浓度之吸光度,也可以理解为比色皿的厚度越大,检出限就越低,所以实验浓度越低,那么要求的比色皿厚度就越高。如果说实验溶液的浓度非常低,那么如果有3CM的比色皿做不出来,用1CM就更检不出来了。一般无论用什么厚度的比色皿,按照标准方法要求就可以了,一般情况下你使用的比色皿长度大于方法要求的长度那么你的实验就不会有问题(也就是说只要你的实验数据没有低于检出限那么比色皿对你就没有影响),因为整条标准曲线和样品都使用同样的比色皿,所以所有的吸光度与浓度的线性关系是不变的。(根据换算公式:①A=abc或②A=εbc A为吸光度,b为液层厚度即比色皿厚度,单位用厘米,c为浓度。其实我们最终要的数值主要是浓度,所以吸光度是多少的关系并不重要,试想一下所有的吸光度都乘以一个同等的数值,与浓度的线性关系没有任何改变的),不需要进行任何的换算。

可以进行换算,公式为:
①A=abc或②A=εbc
A为吸光度,b为液层厚度即比色皿厚度,单位用厘米,c为浓度,在①中,c的单位为克每升,在②中c的单位为摩尔每升,a为常数,ε是吸光物质在特定波长下的特征常数

v