液相hplc常见问题分析资料

一、问:用HPLC进行分析时保留时间有时发生漂移，有时发生快速变化，原因何在？如何解决？

答:关于漂移问题：

1． 温度控制不好，解决方法是采用恒温装置，保持柱温恒定

2． 流动相发生变化，解决办法是防止流动相发生蒸发、反应等

3． 柱子未平衡好，需对柱子进行更长时间的平衡

关于快速变化问题

1． 流速发生变化，解决办法是重新设定流速，使之保持稳定

2． 泵中有气泡，可通过排气等操作将气泡赶出。

3． 流动相不合适，解决办法为改换流动相或使流动相在控制室内进行适当混合

二、问:液相色谱中峰出现拖尾或出现双峰的原因是什么？</B>

答: 1． 筛板堵塞或柱失效，解决办法是反向冲洗柱子，替换筛板或更换柱子。

2． 存在干扰峰，解决办法为使用较长的柱子，改换流动相或更换选择性好的柱子

三、问：HPLC灵敏度不够的主要原因及解决办法</B>

答: 1． 样品量不足，解决办法为增加样品量

2． 样品未从柱子中流出。可根据样品的化学性质改变流动相或柱子

3． 样品与检测器不匹配。根据样品化学性质调整波长或改换检测器

4． 检测器衰减太多。调整衰减即可。

5． 检测器时间常数太大。解决办法为降低时间参数

6． 检测器池窗污染。解决办法为清洗池窗。

7． 检测池中有气泡。解决办法为排气。

8． 记录仪测压范围不当。调整电压范围即可。

9． 流动相流量不合适。调整流速即可。

10． 检测器与记录仪超出校正曲线。解决办法为检查记录仪与检测器，重作校正曲线。

四、问：做HPLC分析时，柱压不稳定，原因何在？如何解决？</B>

答：原因可能有：

1． 泵内有空气，解决的办法是清除泵内空气，对溶剂进行脱气处理；