如何提高胶回收效率

来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/05/31 12:13:45
我是新手,最近在构建载体,我的质粒上要做2次胶回收才能得到目的片段,失败了好些次了,皆因胶回收效率过低。我切8ug,第一次回收4200bp的片段,就只有50ng/ul,再钝化,再纯化,本来第二次应该回收669bp片段的,可因前面的太低,第二次跑的条带紫外灯下都看不到,没有办法继续往下做,急!特急!请大虾给点意见。谢谢

胶回收效率都很低。可以考虑从以下方面改善:1、挂柱子挂两次,即胶溶液离心后再把收集管里液体加到膜上在离心 2、洗脱两次,洗脱后将洗脱液再做为洗脱也上柱洗脱 3、将洗脱液预热到50多度 4、洗脱液偏碱性,可以用TE溶液