PBS缓冲液洗5分钟*3，是浸泡还是冲洗？

来源：百度知道 编辑：UC知道 时间：2024/06/19 08:14:33
免疫组化DAB染色背景过高，怀疑加入SABC后洗得不充分。我是采取浸泡的，不知道是不是应该冲洗。请高手指教。

洗是用浸泡的。背景颜色深不一定是洗得不干净。原因有几点：1）材料自身荧光；2）一抗，二抗的浓度，时间；3）激光共聚焦显微镜的问题，我是指显微镜的好坏，confogo(好像是这样拼写的- -）的显微镜就可以滤去背景荧光。
你说的抗体我没用过，我做过的免疫组化是用的拟南芥和贯叶连翘的愈伤组织，自身激发荧光很强,一抗是58K和Pin1，浓度都是1：250稀释的，二抗是FITC和Cy3，1：50和1:250.一抗4度过夜,二抗2小时.我做的是双标,二抗后先BSA洗1遍,再PBS 3遍.背景每次都还好,对照组的背景也不强.

振荡洗涤