谈谈禽流感的多聚酶蛋白Polymerase(PB1、PB2、PA)，越丰富越好。好的再奖励。

可以参考下《禽流感病毒核蛋白基因的克隆、表达及其相互作用蛋白的筛选》这篇文章。

下载不到 可以给我邮件 ： jackyc911@163.com

多聚酶蛋白Polymerase的只有关于狂犬病毒的和别的一些病毒的～

pfu dna polymerase是目前已知dna合成准确性最高的酶。在正常的pcr扩增程序下，其扩增产物的错误率为4000bp中发生一个。错误率仅为taq dna polymerase的1∕7--1∕10。pfu dna polymerase的耐高温性亦优于taq dna polymerase，变性温度可高至98℃（此时必须加矿物油以免反应组分蒸发）以扩增gc含量较高的模板。
通常pfu dna polymerase的扩增程序为：
变性温度 94℃－98℃， 5－10分钟
变性温度 94℃－98℃， 15秒－2分钟
复性温度 40℃－68℃， 30秒－2分钟
延伸温度 68℃－75℃， 扩增速率1分钟1kb，根据目的片断长度另加15秒至1 分30秒, pfu dna polymerase的最适温度在74℃左右。
扩增25到35个循环。
注意事项:
1. pfu dna polymerase由于具有校正功能，dna合成速率慢于 taq dna polymerase，同时所需的dntp量一般要高于 taq dna polymerase，一些小公司的dntp浓度往往低于其标定值有时甚至要低一倍左右，导致pfu dna polymerase的扩增失败。
2. pfu dna polymerase产生的片断为平末端，不能直接用于t－载体克隆，可用taq dna polymerase加a末端后再用于t－载体克隆或直接在引物的5’端设计合适的酶切位点，酶切后再克隆到相应酶切载体。
3. 保存在－20℃。 本产品pfu dna polymerase 的storage buffer组分为：50mm tris－hcl（ph8.2 at 25℃），0.1mm edta, 1mm dtt，50%甘油，0.05% chaps；
10x reaction buffer with mgso