如何让将固氮基因克隆到pEGFP载体中，并使其在植物中表达

来源：百度知道 编辑：UC知道 时间：2024/05/21 21:44:20
如何让将固氮基因克隆到pEGFP载体中，并使其在植物中表达，整个实验是为了用GFP做标记，观察固氮菌在小麦中的分布。
使用pEGFP载体是否需要加入固氮基因的启动子？如果需要，应该加在哪里？
我是新手，想知道大概的试验思路，请各位高手指点~~~~~~~~~~多谢了~~~~~~~~~~~
CMV是真核启动子，在固氮菌中能正常转录吗？
另外还想问一下，扩增目的基因时怎样在酶切位点后面加保护碱基？不加可以吗？多谢了~~~~
如果这里说不清楚，能否在QQ上联系：499893590，谢谢各位~~~~

不用加启动子。这个载体已经在GFP前面加了CMV的启动子序列了。只需要把你所要克隆的基因用带有特定酶切位点的引物进行扩增，然后连接到GFP前面的MCS内就可以了。转化子用卡纳霉素筛选。

不加，只需要把你的目的基因P的时候加载体上选好的酶切位点，双酶切，连接就可以了。