10微升pcr标准体系

来源：百度知道编辑：UC知道时间：2024/04/30 20:29:47

如题
大家做PCR10微升体系时各种成分都加多少啊？
效果怎么样？
效果好的话请分享下！
万分感谢！

这个不是一概而论的
也没有所谓的标准可言
模板浓度不一样就可造成其他所有成分的不一样
不同的引物不同的退火温度不同的量
建议做PCR之前先优化体系
可建一正交试验表
确定各组分的最佳组合

我原来做过的优化体系：

双蒸水 5.75
10×buffer 1
Mg2+ 0.6
dNTP 0.8
Primer1 0.4
Primer2 0.4
DNA模板 1
Taq酶 0.05

那个和你用的试剂有关啊，dNTP浓度，模板引物浓度，模板种类（比如扩增小麦基因组就可以把模板浓度提高到拟南芥的10倍），引物特异性，buffer里有没有镁离子，tap酶质量等等都有影响。不好说啊