一道生化试题欲求有本事之人赐教

来源：百度知道 编辑：UC知道 时间：2024/06/24 13:18:20
预分离一蛋白质混合液ABC，其中蛋白质A是一种胞外酶，B是不含芳香族的氨基酸，设计这三种物质 的分离方案？（注：C的等电点为5.8，MW为9.6万D，B的MW为15.3D，A可以催化以NAD正离子为辅助因子的氧化还原反应，MW为13.6万D）

这种题不太好答，因为可能的路线很多。
看题意，b不能用紫外检测，层析要注意；a可以用亲和，也可以用NAD的特征吸收检测。等电点不知道有什么用。
可以非变性PAGE，再分别回收，不过比较麻烦，收率低，染色也麻烦。
可以先用分子筛，洗脱时收集，见到第一个峰出完就换管，这样a和b收到一起，c被分开了。然后过NAD亲和柱，b不吸附。最后再把a洗脱下来。

方法很多啊，过个分子筛吧，反正MW差距的。另外用离子交换柱应该也可以吧，不过分子筛就够了。

太深了