免疫共沉淀阴性对照的意义是什么?

来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/06/04 18:35:06
麻烦大家一下,近日看一篇有关免疫共沉淀的文章
不明白为什么要用IgG做对照,参考其他资料只是笼统地说了一下这样做排除了因为其他抗体导致的非特异沉淀的情况,很糊涂,没搞清楚,能不能麻烦哪位仁兄解答一下。
我以为,用特异性的抗体把相互作用的蛋白拉出来,做一个western 杂交确定一下是这两个蛋白就可以了,为什么还要用IgG来做阴性对照呢?
谢谢!非常感谢您的回答

因为要排出污染的可能性。
比如你检测一个兔子细胞的某种蛋白质,你没有设置IgG的对照,而操作中有非特异性蛋白质,又和你设计的抗体作用,那么就出现了阳性结果。如果做了阴性对照,也就是IgG对照,对照没有出现阳性就说明没有非特异性的蛋白,对照出现阳性,说明你的抗体有非特异结合的可能,需要重新开始实验。

怕你的目标蛋白能与抗体相互作用,比如说你要沉淀的蛋白跟金黄色葡萄球菌的A蛋白或补体很类似,你就无语了!