loading control是什么意思啊?

来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/06/25 05:14:34
(C) RT-PCR analysis of SPEM1 in 17 human organs. ACTIN was used a loading control.
(D)Western blot analysis of SPEM1 protein expression in 10 mouse organs. ACTIN was used as a loading control.
我在翻译文献 不知道这里面的loading control是什么意思啊 谁能帮助一下 万分感谢啊

在WB试验中中,最重要和最不可或缺的对照就是内参照(Loading Control,Internal Control)。
内参照的使用有两个方面的作用:
1、 是检测整个WB实验过程及体系是否正常工作,如果一个实验连内参照都出不料阳性结果的话(在内参抗体有效的情况下),那么这个体系就是存在问题的了
2、 半定量的标准:内参一般选择的管家基因编码表达的蛋白,在很多组织和细胞中中都是稳定表达的,因此可以作为检测靶蛋白表达量的标准。

就是对照的意思。做实验最重要的就是要有对照,这里actin是作为阳性对照的,这也是广泛表达的动力蛋白,最常见的内参对照。

内参通常是用来标定细胞量的,如果两个实验组的细胞量不一样,western得到的结果是没有说服力的。

这里的ACTIN也就是肌动蛋白基因作为一种“内标”而存在,内标分子就是用于实时荧光定量PCR反应的目标基因的参照基因,因为其在各种生理条件下的相对稳定表达而被选为参照物,以目标基因相对内参基因也就是“loading control”的变化状况来反映不同生理条件下目标基因的变化。

装载控制手段