UC知道今有以下四种蛋白质的混合物
来源：百度知道 编辑：UC知道 时间：2024/05/04 05:07:54
一个蛋白质混合物含有下面四种不同的组分：甲、乙、丙、丁，具体参数如下：
甲： Mr = 12，000； pI = 10； 乙： Mr = 62，000； pI = 4；
丙： Mr = 28，000； pI = 7； 丁： Mr = 9，000； pI = 5；
不考虑其他因素，详细分析并分别指出在下述情况下被洗脱的顺序。（本大题满分30分）
①、该混合物用DEAE-纤维素柱层析时，以逐渐增高洗脱液的盐浓度方式进行洗脱。
②、该混合物用Sephadex G-50凝胶柱层析分析。
甲： Mr = 12，000； pI = 10； 乙： Mr = 62，000； pI = 4；
丙： Mr = 28，000； pI = 7； 丁： Mr = 9，000； pI = 5；
不考虑其他因素，详细分析并分别指出在下述情况下被洗脱的顺序。（本大题满分30分）
①、该混合物用DEAE-纤维素柱层析时，以逐渐增高洗脱液的盐浓度方式进行洗脱。
②、该混合物用Sephadex G-50凝胶柱层析分析。
属于生化基础题
①、DEAE-纤维素柱为阴离子交换剂，所以选PH11缓冲液，使样品全带上负电，带电量甲<丙<丁<乙,逐渐增高洗脱液的盐浓度或者逐渐降低PH，洗脱顺序为甲>丙>丁>乙
②、Sephadex G-50凝胶柱层析依据分子大小这一物理性质进行分离纯化的。大分子经过的路径短（经凝胶空隙），先洗脱出；小分子经过的路径长（从凝胶珠中穿行）后洗脱出，所以按分子量由大到小排列，洗脱顺序为乙>丙>甲>丁