重组质粒提不出来~~~~~~~急~~~~~~~

来源：百度知道 编辑：UC知道 时间：2024/06/14 06:19:56
最近用试剂盒提重组质粒一直没有结果，提出的质粒跑电泳没有条带，但做PCR可以扩增出目的片段，不知是什么问题，希望高人指点~~~~~
是4T—1和41a质粒，因为是低拷贝，在活化菌时还加了氯霉素~~~~

质粒丰度太低，电泳无条带说明提取得到的质粒量太少而PCR能够扩增出来那么说明质粒已经提取出来了（前提条件是这个片段经过测序证实确实是你的目的片段）。
建议：扩大提取时的初始菌量，可以尝试碱裂解法自己提取，做多管将收集的质粒并为一管后做再纯化，可以提高质粒丰度。

就机会机会

经费充足啊，试剂盒提取量太少，可能就是这个原因吧，用传统方法多提一点试试！