史上最离奇的OD回长事件

来源：百度知道 编辑：UC知道 时间：2024/05/26 09:28:27
我们在培养蛋白表达工程菌（大肠杆菌）的时候，刚植完菌OD600正常向上长，长到1.0左右,OD600在很短的时间就变得很低（0.2左右），菌液变得澄清，经过很漫长一段时间（约10小时）后，菌体OD600又重新长高，而且菌液起沫。我们探讨过培养基以及水的影响，结果都不是，请问各位达人还有什么能够影响OD600像这样反复的变化？如是否和消泡剂有关？自溶？噬菌体？请说出理由，我会追加200分！！！

下面是一个论坛中的帖子与回复，希望能够对你有所帮助：|
我取的-20度甘油保存的菌，过夜复苏，然后按1：100扩大摇一段时间之后加IPTG诱导，摇了3小时之后培养物居然变清亮了！我白思不得其解
望高手指点一下！
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你说的培养物变清凉是相对于1%接种后而言的吗?1：100扩大培养后，细菌变得有多浑浊(测定OD600，一般达到0.5-1.0)?如果加入IPTG后细菌生长得很慢属于正常现象，因为IPTG对细胞有毒性，加之有抗性压力，不携带质粒的细胞是不生长的.关于你遇到的情况，我想可能是:
1.工程菌的问题，可能携带的质粒已经丢失，工程菌不具有抗性，建议在诱导前先检测一下质粒稳定性.
2.活化诱导时加入的抗生素过低未加或失效，扩大培养时加入抗生素又过量，建议重新配制抗生素.
3.加入的IPTG浓度过高.
4.培养基的问题，营养不足.
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1.工程菌的问题，可能携带的质粒已经丢失，工程菌不具有抗性，建议在诱导前先检测一下质粒稳定性.
2.活化诱导时加入的抗生素过低未加或失效，扩大培养时加入抗生素又过量，建议重新配制抗生素，这条也比较勉强。
3.加入的IPTG浓度过高.
4.培养基的问题，营养不足. ，这条不会！
5.噬菌体污染，导致菌体降解。可以重新转化新的感受态细胞。
6。对部分重组菌来说，过低的诱导前菌量常导致有毒性的IPTG诱导后菌体崩解。
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1:不加IPTG时怎么样。
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