质粒多位点酶切片段回收?

引物两端的酶切位点是否一样，还有，距离40-50bp的酶切位点是否也是同一个酶。如果是的话，环形质粒就会切成三段，有一个40-50bp，有一个目的条带，还有载体条带，是可以分开的。如果是不同的酶，你就可以选择使用不同的酶，根据你的要求进行切开。
建议在设计引物时，选择目的基因中没有的酶切位点，选择载体上有的，并且根据在载体上的位置，确定是上游引物还是下游引物，在连接表达载体时就不会出现反连，操作就容易多了。