基因工程中的碱基互补配对

来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/05/12 13:06:20
目的基因被限制性内切酶切为平末端后,构建载体时,是否进行碱基互补配对?

求高手解答。 谢谢

多数情况,带有平末端的目的基因还要经过修饰带上粘性末端,再与运载体连接。这样考虑应该是存在配对的。

平末端连接不靠碱基配对进行,而是直接使用DNA连接酶进行连接。

可以通过平端连接,这个需要对载体进行一些处理,使载体的两端也变成平端,比如通过PFU补平,再对载体进行去磷酸化处理,防止自体连接。平端连接效率可能没用粘性末端效率高,但还是实验室很常用的手段。