急:请问从动物肌肉组织中提取全部蛋白质的方法和相关试剂

来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/05/21 13:04:46
如题
主要包括猪,牛,羊,鸡,兔等常见家畜家禽.
来源是骨骼肌/心,肝,脾等
最好含有所有蛋白质,包括酶类.而不是提取某一个或某一种蛋白的方法.
写的详细完整的我再补分.
谢谢各位帮忙了

三步:
1.破碎细胞 超声或研磨破碎细胞使蛋白质释出,将组织液离心,去除细胞膜等碎片沉淀。
2.盐析 过滤后的组织液加较高浓度的盐(一般用硫酸铵),蛋白质析出沉淀,过滤取沉淀,沉淀加水再溶解。
3.透析除盐 溶液经透析去除先前所加的盐,得到的就是组织中蛋白质的混合溶液。
注:所有操作需在低温下快速进行,以免蛋白质变性失活!

普通的Westerning Blotting Sample准备阶段时候不就是提取全部蛋白吗?要不看看GE Healthcare,应该有这样的Kit。