做pcr时最后保存4度的时间应该以多少为宜?

来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/09/24 06:57:58
程序设定是10分钟,我在做PCR时由于赶时间,十分钟还没有到就结束了PCR过程,请问会影响到结果吗?

不会影响结果的,你说的那10分钟可有可无,如果你在现场的话,等补充延伸过程运行完直接拿出来一点问题也没有。我们设4℃保温是因为当初没在场,所以要把产物在低温保存着,以防DNA降解。保温这一步是根据自己的情况安排的,有时我晚上做,就直接设定4℃保温过夜(10h)。不会影响实验结果的。

10分钟?有这么快嘛?一个循环也要1分钟呀,30个循环很正常吧~再加上机器预热预冷什么的,10分钟能做PCR吗?
而且你不到10分钟...
我看够呛~复制数估计根本不够.............
至于4度保存,放一夜是肯定没事的,我长期晚上做上PCR然后睡觉,放一夜,第二天上午再来开始做后续~

影响肯定是有,但是只是过程没完全结束而已。要看你对结果的依赖性了。

4度保存只是为了不让PCR产物发生其他变化,将PCR产物保存到一个温度直到你将他从PCR仪里拿走,那么4度保存时间一般机器都可以设置到无穷大,直到手动结束。

不会影响到结果的。我试过。有时时间安排紧了,PCR一到4度就拿出来跑胶,没有什么区别,4度只是提供一个短时保存的条件,时间太长反而不好。