连接然后转化大肠杆菌注意事项

来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/05/09 14:17:18
我有一段1。8K左右的片段,用T载体和连接酶连接,然后转化细菌,老是长不出来菌,什么斑也没有,请高人帮忙找找原因。

可能原因:1、 感受态效率低
2、培养基抗生素加的不对或者量加错。
3、涂平板时涂布棒没有充分冷却。
4、连接效率低。

一定注意感受态要从 -80度取出 注意一定是刚解冻就把连接子加进去
我相信你不会是 pcr用的酶不会加上a吧 呵呵

可能连接效率低
转化嘛 那几步认真做不会有问题的