农杆菌质粒

来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/05/21 13:10:03
转化拟南芥等用的农杆菌中,其自身含有几个质粒,大小分别是?
我将PBI121为骨架的载体转入农杆菌后,提质粒大小不对,而且有两条带。
疑惑中。。。

用PBI121的话应该是一般的双元载体系统。不知道你用的是什么农杆菌菌株,GV3101吗?农杆菌自带一个转染用的Ti质粒,但是我做的时候从没提出来过,Ti质粒应该很大的。
质粒大小不对,有两条带。不知道你做过重复没有。你如果不嫌麻烦可以重转一下农杆菌。也可以先做个酶切,看看酶切结果是不是正确。有的时候在菌里面同一个质粒的构像不一致就会跑出两条带,不过会挨得很近。酶切之后通常大小和带数就正确了。琼脂糖电泳就是这样!

作为工程菌的宿主,应该没有其他质粒吧?是不是菌株有问题,最好跟别人再要一个转进去再看看
你酶切下看看大小对不对呢?

超螺旋、开环和线状等不同构象而已。

不懂