APX酶活测定方法

来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/06/25 09:03:33
我想知道APX酶活测定的具体方法、步骤。谢谢

1. 酶液制备 取1.0g植物叶片剪碎,按1∶3(W/V)加入预冷的50mmol/L K2HPO4-KH2PO4缓冲液进行研磨提取,用2层纱布过滤,滤液离心(4000×g)10min,上清液作酶粗提液供测定。

2. 酶活性测定 3ml反应混合液中含50mmol/L K2HPO4-KH2PO4缓冲液(pH7.0),0.1mmol/L EDTA-Na2,0.3mmol/L AsA,0.06mmol/L H2O2和0.1ml酶液。加入H2O2后立即在20℃下测定10~30秒内的A290变化,计算单位时间内AsA减少量及酶活性。