关于PMD-18载体及载体引物

来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/06/21 18:14:46
在做蓝白斑筛选时,将目的片段与pMD18-T载体连接后转化到感受态细胞,再用载体引物扩增后的片段长度比之前的目的片段大多少?是怎么来的?谢谢!

一般是大小一致的,但是主要要看你的目的片段和引物有没有结合位点,要是有的话PCR的大小就不一定了!一般的载体引物都是扩多克隆位点之间的片段,不一样的引物的延伸长度不一定!最好的如果你的片段很大的话最好就是用自己的引物!建议加一步酶切验证,这样的话也可以双保险,如果酶切位点不好选择的话,可以用18Tsimple,然后PCR引物加你自己设计的酶切位点!

为什么不直接切下来
具体大多少去takara看看你用的引物是从哪儿开始的就知道了