关于S1核酸酶作图法;核酸保护实验

来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/05/15 14:56:01
求问一下,S1核酸酶作图法,基因长度900bp左右,我想用基因组DNA的PCR产物和总mRNA或单链总cDNA杂交,用S1核酸酶消化,目的是明确该基因的外显子。问题是有人质疑说900bp的核酸配不上对,请问900bp的核酸能不能正确配对,如果能应该是什么反应条件?另外是用mRNA好还是单链cDNA好?还有核酸酶消化的精确性怎么样?能不能把消化产物的几个片段序列拼接起来当作cDNA序列?

目的是明确该基因的外显子,
既然如此,为何不再两端设计引物,扩增DNA序列后和cDNA序列一比对不就出来了吗?
如果用杂交,只能杂交cDNA,不能杂交mRNA。一般杂交序列在600以下比较合适。

目的是明确该基因的外显子

这个问题有点难啊