液相色谱问题

来源：百度知道 编辑：UC知道 时间：2024/06/23 04:08:26
分析样品是偏苯三酸酐，制成溶液后水解成偏苯三甲酸溶液，杂质是均苯四甲酸、对苯二甲酸、间苯二甲酸三种，流动相用的是甲醇与水（甲醇：水=40：60），柱子是150mm的C18柱，在1分多就出峰，出来的峰是连在一起的，而且中间还有一个凹陷，共有三个峰连在一起，总体形状像波浪线。产品含量在98%左右是正常的，现在测出来的含量要么是100%要么是70%多 ，高手帮忙分析下！
刚买的新柱子换25cm的柱子是不是太浪费了点啊？我在试着加入磷酸调解流动相，梯度洗脱我还不太懂，不会操作，有具体步骤吗？我是新手刚接触液相就碰到这个问题，身边也没有可以请教的这方面老师！非常痛苦！

目标物是酸性的，pKa比较小，在你用的流动相条件下是解离态的，极性大，基本没保留，当然也就没有进行有效的分离，所以1分钟就出峰了，并挤在一起。
办法是用酸性的流动相，比如: 甲醇-磷酸溶液或甲醇-PB，其中磷酸溶液或磷酸缓冲液的pH尽可能低，但不小于色谱柱的承受极限。

出来的峰是连在一起的，而且中间还有一个凹陷，共有三个峰连在一起，
这么说其实是峰没有分开。
应该改变你的流动相，或色谱柱。
流动相PH改变下，用250mm柱子试试。

看来你的色谱条件还不能完全分开样品中的物质，最好采用梯度洗脱试一下。另外1分多出峰好像太早了。
梯度洗脱要用双泵才可以，必须用原装工作站，用程序控制，你问一下液相制造商。每次积分的时候用垂直切割积分看看。