tris hcl缓冲液配制,内含……的物质起什么作用啊?怎么加入?内含物的加入浓度怎么算啊??急急急急!!

来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/04/29 07:30:33
硫酸铵沉淀法:将样品进行粉碎,过100目筛,取10g置于锥形瓶中,按照1:8比例加入0.05mol/L PH=8 Tris-HCI缓冲溶液,内含0.1mol/L的NaC1,5mmol/L的EDTA,2%PVP(聚乙烯吡咯烷酮),lmmol/L 2-巯基乙醇。冷藏浸泡12h,按V/m=5:3比例加入硫酸铵固体(加硫酸铵时,磨成细粉,缓慢加入,搅拌溶解,再进行慢速机械搅拌,共计1h) →4000 r/min离心20 min→得上清液。

Tris-HCl缓冲液(0.05 mol/L)
50毫升0.1mol/L三羟甲基氨基甲烷(Tris)溶液与X毫升0.1mol/L盐酸混匀并稀释至100毫升。
pH (25℃) X (mL)
7.10 45.7
7.20 44.7
7.30 43.4
7.40 42.0
7.50 40.3
7.60 38.5
7.70 36.6
7.80 34.5
7.90 32.0
8.00 29.2
8.10 26.2
8.20 22.9
8.30 19.9
8.40 17.2
8.50 14.7
8.60 12.4
8.70 10.3
8.80 8.5
8.90 7.0

Tris分子量=121.14 ;0.1 mol/L溶液为12.114 g/L。Tris溶液可从空气中吸收二氧化碳,使用时注意将瓶盖严。

http://biotech.about.com/od/buffersandmedia/ht/trisbuffer.htm
http://wiki.symplus.co.jp/doku.php/bio/en/tris-hcl_buffer