如何获取目的基因片段

来源：百度知道 编辑：UC知道 时间：2024/06/15 15:37:21
各位高人：
目前我紫外诱变得到一株高产核酸酶P1的桔青霉突变株。现在想通过分子生物学方法比较看看出发菌与突变株的核酸酶P1基因序列是否发生了一些突变位点。
核酸酶P1基因序列是已知道了，从网上查到的，如何扩增出相应的片段呢？
是不是直接以已知序列设计引物，以桔青霉DNA为模板扩增，然后测序比较呢？是否可行？
因为桔青霉是真菌，不知这样的思路是否正确，急盼高人指点啊！

提RNA反转录得到cDNA，以cDNA为模板进行扩增才能排除内含子的干扰，要知道你的研究对象是真核生物。

楼上的，为什么要排除内含子的干扰呢？突变和影响也不一定是发生在编码区啊，而且，从RNA到cDNA的过程中，由于反应的酶没有校正的作用，很容易在此过程中出现错配，更容易造成结果不准确！