琼脂糖电泳时,条带为何在点样孔中跑不出来?

来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/06/17 08:04:41
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蛋白污染 抽提的时候把蛋白相吸起来了

marker也跑不出来吗?那通电的时候看到气泡了没?

如果看到了,说明电泳槽是通电了的,那么有以下几种可能:

1. Buffer 错了 (配胶的buffer应该和电泳槽的buffer保持一致, 如果用TAE配胶,就要用TAE buffer 跑胶)
2. 气泡问题,上样的时候点样孔里面是不是有气泡?
3. 电压在80V以下,跑得太慢,短时间观察不到
4. 用的agar浓度是多少?一般是0.8g-1g/100ml比较好.
5. 这个可能性不是很大,正负极接反了

如果没看到,说明电泳槽没有通电,那么有以下三种可能:

1. buffer太少了,没有没过通电的金属丝
2. 正负极插头没有插好,线松了
3. 电泳槽挂了

是不是没插好啊

1)可能条带中(目的DNA)掺有基因组DNA(因基因组DNA分子量很大,不能从上样孔中出来)
2)可能条带中(目的DNA)掺有蛋白质(因蛋白质与DNA一起,分子量很大,不能从上样孔中出来)

总之,你目的DNA提取、分离的不纯,掺有基因组DNA或没有和蛋白质分离开,因此导致分子量大大加大,跑不出上样孔

还有一个可能,就是你电压没加上,或你电泳缓冲液是用蒸馏水配制的,没有离子,不能导电,DNA没有泳动。