PCR加引物和模板问题

来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/05/15 04:41:44
做PCR时引物和模板在加之前要不要先离心一下,不然会不会出现最后跑电泳时没有条带。
还有我把水、buffer、Dntp、mg离子做一个mixture后要不要离心一下再分装。

1。引物和模板在加之前离不离心 跟以后有没有条带没有关系。PCR没有条带一般是因为各物质之间的比例或者退火温度不合适,你需要调整和优化。每换一种试剂都要重新优化PCR条件。

2。把水、buffer、Dntp、mg离子做一个mixture后,一般要先混匀再离心一下, 以保证mix的均匀性和可靠性。
luck!同行。

在所有组分加完后稍微离心一下,不要在管壁上沾有液滴、管内没有气泡即可。
分装前的离心就免了。

都没必要
你先加量最多的,一般是水,然后加入后面的成分时将tip头插入到液面下加样即可,根本不会有什么粘壁

不要
不要 每个PCR的体系是不同的 不能先混