全血细胞培养染色体,想直接弄破细胞膜把染色体游离出来,在溶液中用光学显微镜观察染色体,能否可行?
来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/05/05 15:48:41
不可行,一般还需要进一步提纯,变成胶状物,具体可参见高中课本
另外,用光学显微镜观察在溶液中的物质,这好像不可能吧?都要做成玻片的
给你看下需要的试剂你就能知道过程多复杂了,剩下就自己解决,不行就去借高中的课本....
全血细胞培养染色体技术常用试剂配制
一、国内实验室应用试剂配制
(一)培养液
(1)RPMI1640培养液:称取RPMI培养基9.8g,碳酸氢钠1.9g、青霉素100u/ml,加双蒸水至1000ml,调节 pH7.2~7.4无菌过滤冻存备用。
(2)小牛血清商品:成都生物制品厂。
(3)植物凝集素(PHA):自制或成品(重庆药检所)。
(4)pH调整液:5% NaHCO3溶液高压灭菌(8磅15min),0.1N稀盐酸液100ml。
(5)秋水仙素:10mg/ml无菌过滤高压灭菌(8磅10min)。
(6)磷酸缓冲液:pH7.4。
磷酸氢二钠28.8g(H2O)、磷酸二氢钾2.67g(无水),溶于1000ml双蒸水中,加肝素,终浓度为100u/ml。
(7)Giemsa染色液:
Giemsa粉剂 1g
甘油 66ml
在研钵中,加入少量甘油油仔细研磨然后放甘油全部加磨,60℃温箱中保温2h,冷却后加入甲醇66ml。装入有色瓶中混合待用。染色时用pH7.4磷酸缓冲液稀释10倍,随配随用。
(二)固定液
(1)甲酸:冰乙酸3:1混合即用。
(2)PBS缓冲液配制:
NaCl 16g Na2HPO4(12H2O) 5.65g
KCl 0.4g KH2PO4 0.4g
加双蒸水至1000ml pH7.0。
取5%胰酶(生理盐水配制)1ml加入50ml PBS液中(最终浓度为0.025%),4℃冰箱待用。
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