x-gal粉末配法

X–Gal
（5–Bromo–4–Chloro–3–Indolyl–β–D–Galactoside）
使 用 说 明 书
Code No.：ZB136
包 装 量 ： 100mg
价格：169.00元
储运温度 ： ―20℃
形 态 ： 白色粉末
分 子 量 ： 408.6
纯 度 ：
◆ 作为β–galactosidase的底物进行了生物活性检定。
◆ 通过TLC分析确定纯度。
用 途 ：
X–Gal是β–半乳糖苷酶（β–galactosidase）的底物，水解后呈蓝色。基于这个特点，pUC系列载体DNA（或其他带有lacZ 基因载体DNA）以lacZ 缺失细胞为宿主进行转化时、或用M13噬菌体载体DNA进行转染时，如果在平板培养基中加入X–Gal和IPTG，由于β–半乳糖苷酶的α–互补性，可以根据是否呈现白色菌落（或噬菌斑）而方便地挑选出基因重组体。
使用方法 ：
首先把X-Gal配制成20 mg/ml的二甲基甲酰胺（DMF）溶液（-20℃避光保存），然后在100 ml的琼脂培养基中，加入200 μl的上述溶液、100 μl的IPTG（24 mg/ml）和100 μl的Amp（100 mg/ml），制作成X-Gal、IPTG、Amp平板培养基。当DNA片段插入至pUC系列载体（或其他带有lacZ、Amp基因载体），然后转化至lacZ缺失细胞中后，涂布上述的X–Gal、IPTG、Amp平板培养基，可根据长出菌体的蓝白色，而方便地挑选出基因重组体（白色为具有DNA插入片段的基因重组体）。
注意事项 ：
◆ 培养噬菌体时，Top agar中的添加量为：50 μl/3 ml（20mg/ml）。
◆ 含有X-Gal的培养基4℃避光保存，须在1~2周内使用。