真核细胞亚细胞定位实验的原理及步骤？

原理：构建编码目标蛋白和荧光蛋白的融合蛋白的载体，转染细胞，表达，然后激光共聚焦显微镜观察荧光信号所在位置，即可知道该蛋白的亚细胞定位。注意做空载荧光蛋白的对照。

具体步骤：构建目标蛋白与GFP的融合蛋白的瞬时表达载体，基因枪轰击洋葱内表皮细胞，或化学（PEG）转化原生质体，瞬时表达后用荧光显微镜观察荧光位置，当然激光共聚焦图片会更漂亮。

构建编码目标蛋白和荧光蛋白的融合蛋白的载体，转染细胞，表达，然后激光共聚焦显微镜观察荧光信号所在位置，即可知道该蛋白的亚细胞定位。注意做空载荧光蛋白的对照。

具体步骤为 构建目标蛋白与GFP的融合蛋白的瞬时表达载体，基因枪轰击洋葱内表皮细胞，或化学（PEG）转化原生质体，瞬时表达后用荧光显微镜观察荧光位置，当然激光共聚焦图片会更漂亮。