标记基因作为重组DNA载体的重要标记的问题

来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/06/22 08:26:30
大肠杆菌的某种质粒具有青霉素抗性基因(该基因可以认为是标记基因),当这种质粒与外源DNA组合在一起形成重组质粒.....其中的“质粒与外源DNA组合”是有可能没组合上吗?
为什么可以根据受体是否具有青霉素抗性来判断受体细胞是否获得了目的基因?

在基因工程中当然会出现外源DNA没有整合到质粒上的现象。
受体是否具有青霉素抗性只能证明受体细胞获得了质粒,至于是有没有连接上外源DNA片段的质粒则是一般不知道的。因此一般使用双选法。即有一个标记基因是抗性基因,另一个基因常用的是lacZ基因。这样通过蓝白斑筛选可获得转入了重组质粒的细胞。

如果限制酶切位点就在这个基因上的话,可以判断质粒与外源DNA重组了。
酶切位点不在这个基因上的话,就不好说了,可能只是质粒自身成环。
一般的重组载体都有2个标记基因,酶切位点在其中的一个基因上,这样子既可以筛选转化子,又可以筛选重组子。

补充:受体是否具有青霉素抗性只能判断质粒是否进入受体细胞

是有可能没组合上,还有可能质粒与质粒发生组合

课本上讲的检测过程是非常简单的,不能区分是导入普通质粒还是导入重组质粒的问题,如果要检测的话,还需要其它条件,例如标记基因有两个或以上时才可能检测出来倒底是导入普通质料还是重组质粒,具体过程可以自己查资料,太长了,得半天打