CRP单克隆抗体制备的小问题

杂交瘤细胞本身就带有骨髓瘤细胞易于生长的特性。只要条件控制得到，易于培养是显而易见的。

克隆化培养就是最初靠细胞融合获得的少量能够产生所需单抗的杂交瘤细胞的扩大培养过程。冻存只是保存手段，不是克隆化培养。

ps：复苏后的细胞注入小鼠获得单抗后，最好测一下抗体效价。

从原始孔中得到的阳性杂交瘤细胞，可能来源于二个或多个杂交瘤细胞，因此它们所分泌的抗体是不同质的。为了得到完全同质的单克隆抗体，必须对杂交瘤细胞进行克隆化。另一方面，杂交瘤细胞培养的初期是不稳定的，有的细胞丢失部分染色体，可能丧失产生抗体的能力。为了除去这部分已不再分泌抗体的细胞，得到分泌抗体稳定的单克隆杂交瘤细胞系（又称亚克隆），也需要克隆化。另外，长期液氮冻存的杂交瘤细胞，复苏后其分泌抗体的功能仍有可能丢失，因此也应作克隆化，以检测抗体分泌情况。
小鼠骨髓瘤细胞能在体外无限增殖传代并能分泌无抗体活性的球蛋白；免疫小鼠脾细胞能产生针对某种抗原的抗体，但不能在体外无限增殖。将两者融合成一种杂交瘤细胞，后者继承了两个亲代细胞的特点，既可在体外无限增殖，又可产生针对某种抗原的抗休。
复苏细胞的状态与细胞的冻存和细胞复苏的操作有关。冻存细胞选对数生长期的细胞，且冻存前一天换一下培养基。细胞冻存是细胞在加血清和二甲基亚砜的培养基中以一定的缓慢速度下降温度（0℃—— -20℃，每分钟下降1℃；-20℃—— -40℃每分钟下降2℃），可在-196℃液氮或液氮蒸气中长期保存。复苏时融解细胞速度要快，使之迅速通过最易受损的-5℃—0℃，以防细胞内形成冰晶引起细胞死亡。