重组质粒如何鉴定

来源：百度知道 编辑：UC知道 时间：2024/06/15 03:21:53
哪位大侠详细帮我介绍一下重组质粒的鉴定方法有哪些？要有过程的哦.谢谢哦。
比如说质粒含有两个标记基因抗青霉素也抗四环素，目的基因插入到抗四环素基因中。实验步骤：
1.在一个平板上加入青霉素，则生长起来的是导入质粒的菌落，但这些质粒有可能是空质粒，有可能是导入目的基因的质粒。
2.再拿六个平板，都加入四环素，分别在上一个平板上挑取单菌落，并分别图在六个平板上，不生长的对应菌落则是插入目的基因的质粒。
大侠这之后是不是就可以断定哪个是插入目的基因的菌落了？还用进一步断定吗？我看他们还有交公司测序的，什么作用？公司会给他们什么东西？测序图？什么样子？
呵呵问题有些多，谢谢

是区分重组质粒与普通质粒吗？
如果是，最简单的方法就是用探针进行DNA分子杂交
另外还有种方法，当普通质粒上有两个或以上的标记基因，而目的基因的拼接处正好破坏一个标记基因就可以
如：普通质粒，抗青霉素也抗四环素，但目的基因正好插入时破坏了抗四环素基因，那么，双抗的就是导入普通质粒，只抗青霉素而不抗四环素的导入的就是重组质粒，都不抗的没有导入质粒。

看目的基因是否表达