如何提取大鼠心肌线粒体啊？

1、取100mg心肌组织用剪刀尽量剪碎，然后转入EP管中加入1ml 0.25%的胰酶冰浴20分钟，冰浴过程中可上下颠倒EP管让胰酶充分消化组织。
2、倒掉胰酶并用匀浆介质1ml洗下组织，稍离心后倒掉上清。
3、将组织移入玻璃匀浆器中，加入1ml匀浆介质，用中等大小力置冰上匀浆约35次(用tip头吸成液体状，无组织块)；然后将匀浆液吸入EP管中。
4、离心：4度，1400g*10min，取上清；再加入0.5ml 匀浆介质重悬沉淀，4度离心1400g*10min，取上清。
5、将两次的上清液一起离心，4度，15000g*15分钟。取沉淀(看到浅褐色和深褐色的物质，深褐色物可能是线粒体)，用0.12ml匀浆介质重悬沉淀。
6、染色：用詹纳斯绿B染料进行染色，置显微镜下进行观察，可见棒状和短棒状蓝绿色物应为线粒体，同时还可以看到一些大的圆形物，可能是成团的细胞块。