求 酶活力单位的计算公式

来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/05/10 16:50:42
本人在做毕业论文,是做酶活力测定的,但是不是很懂。。。
问题: 测定管 对照管
NAD溶液 2.8mL 2.8mL
上清液 0.1mL -
乙醇溶液 0.1mL -
蒸馏水 - 0.2mL
单位定义:单位时间内OD340改变0.001为一个活力单位U。
该酶的摩尔消光系数是 am=6.22×1000
上清液由0.5g肝组织加上4.5mL制成10%肝匀浆离心分离制得的,我是在340nm记录测定管5min内每分钟变化率△A。
那么通过5min变化的OD值,怎么求算总酶活力????

NADH在340nm有最大吸收,此酶应该是催化NAD产生NADH,计算NADH的变化率

组织重进行换算(U/g):△A/min÷0.001÷(6.22×1000)÷比色光径(cm)÷匀浆浓度(0.5g÷4.5mL)
按蛋白浓度进行换算(U/gprot):△A/min÷0.001÷(6.22×1000)÷比色光径(cm)÷蛋白浓度(gprot/L)

用5min内改变的OD值除以0.001即可。

酶活力单位(U,active unit)
  酶活力的度量单位。1961年国际酶学会议规定:1个酶活力单位是指在特定条件(25℃,其它为最适条件)下,在1分钟内能转化1微摩尔底物的酶量,或是转化底物中1微摩尔的有关基团的酶量。
  酶活力单位:用来表示酶活力大小的单位,通常用酶量来表示。
  其中一个称酶活力国际单位,规定为:在特定条件下,1分钟内转化1微摩尔底物,或者底物中1微摩尔有关基团所需的酶量,称为一个国际单位(IU,又称U)。
  另外一个国际酶学会议规定的酶活力单位是Kat,规定为:在最适条件下,1秒钟能使1摩尔底物转化的酶量。
  Kat和U的换算关系:1 Kat=6×107U, 1U=16067n Kat
  酶的比活力(specific activity):是指每毫克质量的蛋白质中所含的某种酶的催化活力。是用来度量酶纯度的指标。是生产和酶学研究中经常使用的基本数据。