如何测定葡萄中的葡萄糖含量

来源：百度知道 编辑：UC知道 时间：2024/06/16 14:59:50
我想做一个关于测定葡萄及葡萄酒中葡萄糖含量的测定，经过查资料得知，葡萄浆果除含水分外，还含有约15%～30%糖类(主要是葡萄糖、果糖和戊糖)，各种有机酸(苹果酸、酒石酸以及少量的柠檬酸、琥珀酸、没食子酸、草酸、水杨酸等)和矿物质，以及各种维生素、氨基酸、蛋白质、碳水化合物、粗纤维、钙、磷、铁、胡萝卜素、硫胺素、核黄素、尼克酸、抗坏血酸、卵磷脂等。我想请问，如何才能屏蔽其他糖类，有机酸等对葡萄糖测定的影响，同时又能较好的测出葡萄糖的含量，以及所需要的试剂，仪器等，谢谢
那请问总糖怎么个容易法啊？能详细一点不，谢谢了？

葡萄糖氧化酶法。
　　1．原理
　　葡萄糖在葡萄糖氧化酶的作用下产生葡萄糖酸和过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶的作用下使邻联甲苯胺生成蓝色物质，该有色物质在625 nm波长下与葡萄糖浓度成正比。通过侧定蓝色物质的吸光度值可计算样品中葡萄糖的含量。
　　2．仪器
　　①实验室常用设备。
　　②722型分光光度计。
　　3．试剂
　　除特殊说明外，实验用水为蒸馏水，试剂为分析纯。
　　①三氯乙酸(40％)：称取4．0 g三氯乙酸，用水溶解并稀释至100 mL。
　　②无水乙醇。
　　③2 mol·L-1NaOH溶液：称取8 g NaOH，用水溶解并稀释至100 mL。④1％邻联甲苯胺溶液：称取0．1 g邻联甲苯胺溶解于10 mL无水乙醇中，倒人棕色瓶中，4℃冰箱保存。
　　⑤乙酸缓冲液(pH5．O)：称取14．28 g乙酸钠(CH。COONa．3H20)溶于水中，加入2．7mL冰乙酸，使pH为5．O，用水定容至1L。
　　⑥葡萄糖氧化酶溶液：称取一定量的葡萄糖氧化酶(Sigma公司)用水溶解，使酶含量为100U／mL。4℃冰箱保存一周。
　　⑦过氧化物酶溶液：0．010 g辣根过氧化物酶溶于10 mL7J(~，4℃冰箱保存一周。
　　⑧酶溶液：取100 mL乙酸缓冲液，分别加入邻联甲苯胺溶液、葡萄糖氧化酶溶液、过氧化物酶溶液各l mL，混匀。4℃冰箱可保存7周。
　　⑨酶空白液：取100 mI。乙酸缓冲液，分别加人邻联甲苯胺溶液、过氧化物酶溶液各l mL，混匀。4℃冰箱保存1周。(注意酶空白液中不含葡萄糖氧化酶)
　　⑩葡萄糖标准液：将葡萄糖标准品(纯度大于99％)于80℃干燥至恒量。精确称取O·050 g，用水移人100 mL容量瓶中，定容至刻度线。此标准液相当于浓度为0．5 mg．mI。_。。
　　4．操作步骤
　　①样品处理
　　a．固体样品：称取0．5～5 g已粉碎的样品于锥形瓶中，加入50 mL水后沸水浴15 min。冷却后，转移至100 mL容量瓶中并用水定容至刻度，反复摇动混匀样品，过滤，弃初始几滴滤液。收集滤液，如果滤液澄清，可直接用于测定或稀释后用于测定。如果滤