液相色谱:什么叫梯渡?

来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/05/10 12:07:54

对于组分复杂的样品,采用一种色谱体系,很难得到理想的分离结果。要么分离时间太长,要么分离度太差。

液相色谱中采用梯度洗脱,目的:缩短的时间;提高分离效果。

梯度洗脱:流动相由几种不同极性的溶剂组成,通过改变流动相中各溶剂组成的比例改变流动相的极性,使每个流出的组分都有合适的容量因子k',并使样品种的所有组分可在最短时间内实现最佳分离。

梯度洗脱特点:
提高柱效
改善检测器的灵敏度
当样品中的一个峰的k'值和最后一个峰的k'值相差几十倍至几百倍时,使用梯度洗脱效果特别好。
梯度洗脱中为保证流速的稳定,必须使用恒流泵,否则难获重复结果。
梯度洗脱常用一个弱极性的溶剂A和一个强极性的溶剂B。

梯度范围:指流动相中强溶剂分别在起始液和终止液中的浓度。
调节梯度范围对得到最佳的梯度分离起重要作用。
最佳梯度范围:第一个峰处分时间大约为2倍的t0,梯度结束时把最后一个峰洗脱出来。

是梯度。
顾名思义,程阶梯装的不同浓度(洗脱)。
液相的原理就是相似相溶,通过物质吸附性不同的,使之通过色谱柱的时间不同,进而达到分离、分析等目的~
简单说是这样滴~

在色谱法中存在两相,一相是固定不动的,我们把它叫做固定相;另一相则不断流过固定相,我们把它叫做流动相。使用外力使含有样品的流动相(气体、液体)通过一固定于柱中或平板上、与流动相互不相溶的固定相表面。当流动相中携带的混合物流经固定相时,混合物中的各组分与固定相发生相互作用。

至于梯度:
如果你用假设是50%的乙醇洗(就是流动相),它的洗脱效果是一定的;然后,你再用30%或者40%的乙醇洗,就可能有溶于50%乙醇的物质被洗出来,就分离了。
而控制不同梯度,就可以比较精确的控制被洗出物质的极性,更容易确定被洗出的物质。
一般,同一种流动相(不一定是单一的物质,可能是混合物;比如,乙醇和乙腈混合物)的不同浓度洗脱,就是梯度洗脱~

梯度
改变流动相中各溶剂组成的比例 使样品种的所有组分可在最短时间内实现最佳分离