用茚三酮法测蛋白水解度应该怎样做？步骤和计算公式？

如果已做完标线，可以按下列公式进行计算： 

    注意：将图片放大，看得更清晰。公式中DH即为产物水解度(Degree of hydrolysis，DH)， 用于衡量蛋白质的水解程度，定义为蛋白质水解过程中被裂解的肽键数h(mmol/g蛋白质)与给定蛋白质的总肽键数hhot (mmol/g蛋白质)。

    补充：

    1. 7.8 mmol/g是给定蛋白质即大豆蛋白质的总肽键数，以hhot（hot为h的右下标）表示。 

    2. 操作与计算：

    (1)标准曲线的绘制 （因已做完，故略去）

    (2)水解蛋白液中-NH2基的测定（茚三酮法）：取水解蛋白液0.50 mL定容至50 mL，取0.40 mL稀释液于试管中并加入1.60 mL蒸馏水、1.00 mL显色剂，混匀后置沸水浴中加热15 min，同时作空白试验。以后操作同标准曲线。利用标准曲线计算水解蛋白液-NH2的含量(μmol/mL)。

    (3)水解蛋白液中蛋白质含量的测定：取1.00 mL水解液进行湿法消化处理，然后在蒸馏仪上蒸馏进行人工滴定定氮，蛋白质的含量表示为N×6.25 mg/mL。

    (4)结果计算：原料蛋白质中存在游离的-NH2基，在计算时要考虑它的影响，否则计算的DH值偏大。