在免疫共沉淀过程中的问题~加蛋白标签

来源：百度知道 编辑：UC知道 时间：2024/05/15 02:25:15
我用加了GFP或者Myc标签的表达质粒表达蛋白，然后做CO-IP！
用抗GFP抗体将复合物拉下来可以不？
GFP会不会和细胞内其他蛋白相互作用也形成复合物而影响结果啊？
我表达的目的蛋白是想筛选相互作用蛋白，通过把GFP拉下来，GFP连接了我的表达蛋白A，蛋白A可以把未知的蛋白X一起拉下来么？
加了GFP的会不会影响蛋白A的结构域啊？

你CO-IP的目的不是要目的蛋白么
GFP这种外源的一半不会和体内的蛋白相互作用
但是即使作用了 你要的目的蛋白肯定会下来
管它其他的蛋白下不下来呢

相比于GFP，RFP 倒是会形成复杂的复合物影响相互作用或是产生细胞毒性。
一般而言GFP不会影响蛋白质的折叠，你要不放心的话最好选用flag 或者 HA
这种小一点的 标签