如何测定微生物酶活性

来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/05/10 23:23:40

看是什么酶了,比如我们做过的蛋白酶就是:
样品管处理:吸取0.5%酪蛋白溶液2 mL置于试管中,在40℃水浴中预热5分钟后加入同样条件下预热好的酶液1 mL,立即计时。反应10分钟后,由水浴取出,并立即加入10%三氯乙酸溶液3 mL,室温下放置15分钟后,4℃、6000转/分离心10分钟。

对照管处理:同时另作一对照管,即取酶液1 mL,先加入3 mL10%的三氯乙酸溶液,然后再加入0.5%的酪蛋白溶液2 mL,40℃水浴中保温10分钟,室温放置15分钟,4℃、6000转/分离心10分钟。

显色:取3支试管,编号。分别加入样品处理及对照处理上清液和水各1 mL,然后各加入0.55mol/L的碳酸钠溶液5 mL,混匀,立即加入Folin试剂1 mL,立即混匀,40℃水浴中显色15分钟。

吸光度测定:以加水的那一管作为空白,测定样品及对照在680nm下的吸光度A680。

希望有用