生物--基因工程

三种——载体与载体、目的基因与目的基因、载体与目的基因

就两种吧！！
平末端连接和粘性末端~~~

还可以用加尾酶添加一定的核苷酸尾巴后连接（还可通过其他的酶修饰后连接），但是基础的说还是属于blunt end和cohesive end（sticky end）！！！

你好！
你所谓的连接方式即重组情况，共有三种：质粒和质粒重组，目的基因和目的基因重组，质粒和目的基因重组。只有质粒和目的基因重组的情况才是基因工程所需要的。因此在用DNA连接酶重组后，还要用选择性培养基进行筛选。
谢谢！

只用一种限制性内切酶切割载体和目的片段的话，链接效果不是很好。因为会发生载体和目的片段分别自连的情况呀，最好采用双内切，即两种酶内切以防止自连。

在经过双切后，一般都是用T4 ligase进行连接，需要两个小时左右的反应时间。现在NEB（New England Bio）出了一种新的连接酶产品，quick ligase，反应时间只需10-15分钟，反应原理是相同的。但从我个人来说，这种酶效果不是很好。

最引人关注的还是Clontech去年出的一种叫做In-Fusion的连接方法，与酶切法不同，In-Fusion是利用目标片段和载体上下游的同源性（3',5'各15bp）进行连接，可以大大提高构建载体的速度，个人经验来说，虽然稍微贵了一点，效果还是非常好的。如果你有兴趣，可以看一下：http://clontech.takara-bio.co.jp/manuals/pdf/PT4065-1.pdf
但我不是很清楚国内有没有他们的代理哈。

现有的连接技术就是以上几种了