问个关于PCR比较白痴的问题

来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/06/22 01:23:02
现在做实验,没有人指导,所以一些基本的问题也不清楚。现在我在做体外培养细胞,包括实验组和对比组共分为三组,准备都接种在六孔板上,那么准备做PCR的时候是不是要实验组和对照组都需要做复孔,做几个,这几个孔都是一样的处理??那重复的孔个数不多的话,是不是会误差比较大呀??是不是同样处理的所有细胞混合提RNA,还是分别每个孔提出来的PNA做进一步的处理呀。

楼主做的应该是定量PCR实验把?

1。培养细胞的时候做平行,是为了消除培养细胞过程带来的随机误差。如何消除,那就是把复孔培养之后的细胞混合起来。然后在抽提RNA,继续下去。

2在做定量PCR的时候同样要消除定量PCR时的误差,因此定量的时候也要做平行。一般来说平行越多,出来的结果可信度越高,象你这样其实只有3个样品我建议多做几个平行,比如6个平行。

3所谓平行实验,当然时处理过程一样才称得上平行实验。

要看你的实验目的了,以及实验结果的不确定度,如果实验误差相对于实验结果很小的话不平行也可以啊。

估计没错的话,楼主体外培养细胞应该是做扩增病毒用的吧?如果是这样的话,假如你扩增的是同一种病毒,而且攻毒的细胞是在一个条件下进行,并且你的目的只是检测病毒是否复制的话,可以几个孔混合提取,但如果你是不同条件,而且你的目的是在于摸索病毒复制的规律话,那么应该分开提取RNA。至于你说的对照,目的是在于做一个阴性对照,相同条件下培养的可以混合提取RNA。