CTAB法提取DNA的问题。

来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/06/07 16:16:39
最后加入TE溶解DNA,有一块棕红色沉淀溶解不了,那是什么,会影响DNA质量吗?
另外有必要做电泳检测吗?
大部分经TE溶解后都是澄清的,少部分就会有一块棕红色沉淀溶解不了,这是什么物质?怎么避免? 另外如果电泳检测没有带的话是不是一定就不能用来跑PCR,需要重提了?

前面的步骤没有操作好,要么是你的样品比较特殊,含有较多的色素或脂肪,先用电泳检测一下,如果条带清楚就可以用,如果混乱要修改实验设计。
不知道你提的是动物还是植物的DNA,估计可能是植物色素或者是叶片的蜡质层,甚至可能是药品本身变质发生反应造成的。
提DNA要多做几个重复,逐个排查问题,当然最终的结果是电泳检测结果说了算的。如果检测条带不清楚一般重提一次,如果仍然不清楚那么就要修改方法了。条带清楚到什么程度就可以用是根据你实验的要求定的,比如做ISSR或者RAPD对条带要求就低一点,做SSR要求就要高些。

那有可能是你在吸取上清液的时候吸到下沉物质 可能是多糖,多酚之类的物质 对DNA的质量应该是挺大的,你可以用氯仿多萃取一次,
一般来说电泳检测不到DNA 就可能是没有的,
建议你重新提取