怎样鉴别蛋白质和抗生素
来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/05/06 20:23:31
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首先,应该查阅文献,了解一下这"可能"是什么东西。有一些抗生素本身就是蛋白质,但也有的是有机小分子。
分两种情况:
一、如果确定这种抗生素不是蛋白质,而是有机小分子,比如青霉素,红霉素。
透析法:
蛋白质是大分子,不能透过高分子滤膜,而有机小分子抗生素可以。
那么,把样品用高分子滤膜透析就行了。有机分子能穿透透析膜,蛋白质不能。在充分透析后,测试透析袋内和透析袋外的两种溶液哪一种有了原滤液对病原菌的拮抗作用,就能知道是蛋白质还是有机小分子(抗生素)在发挥作用了。
此外,检测蛋白质的方法还有:
紫外分光光度法
pro及其降解产物的芳香环基 ,在紫外区内对某一波长具有一定的光选择吸收,在280nm下,光吸收与pro浓度(3~8mg/ml)成直线关系。但是一些抗生素也有芳香环基...如氨苄青霉素
水扬酸比色法:
原理: 样品中的pro经H2SO4消化转化为铵盐溶液后,在一定的酸度和温度下与水扬酸钠和次氯酸钠作用生成有颜色的化合物,可以在波长660nm处比色测定。但是一些抗生素也能消化出铵盐溶液...再举氨苄青霉素的例子。
Western Blot/ELISA法
如果能猜测是什么蛋白质,那么可以订购相应的抗体,用Western Blot或ELISA检测。
柱层析法
用柱子走层析,用紫外分光光度器监测吸光度值,同时用几种猜测的蛋白质分别作为对照过柱,看哪个和样品有相同的条带。
Western Blot和柱层析需要特殊的仪器,不一定每个实验室都有,我觉得还是透析法最简便易行,还直观可靠。
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二、如果你所说的抗生素本身也是蛋白质(如嗜盐菌素,大肠杆菌素)那更好办了。
订购一个大肠杆菌素(或其他对应抗生素)的抗体,跑个Western或者做个ELISA,就知道是不是了。
也可以柱层析看是不是和大肠杆菌素(或其他对应抗生素)标样同时出柱,不过