PCR体系怎么混匀

来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/06/21 04:15:08
PCR体系在加入酶之前如何充分混匀?漩涡振荡还是手弹,或者颠倒混匀?加入酶之后再如何混匀呢?分装到小管,加入模板后再如何混匀?是否要低速离心?

鉴于PCR体系一般为30微升以下,一般采取吸打混匀方法,漩涡、手弹、颠倒都会使整个体系挂壁,不能很好混匀。
加酶、加模板后也是用吸打的方法。
PS:如果模板是基因组DNA,建议用火将枪头烧至无棱角,避免吸打切断基因组
一般不需要低速离心,也有一种说法,说低速离心也可以很好的混匀体系,但是考虑到如果甘油没有溶解完全,低速离心会让甘油沉底,不建议采用。

加酶的时候为了防止浪费要反复吸打几次,然后轻弹一下就好,最后在离心机上点离一下

一般用手弹几下就够了

用手弹,或者说,轻轻的来回拨动。
用移液枪来回吸打。
不需要离心