EMSA探针设计

来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/05/24 12:36:24
EMSA探针具体怎么设计 要测转录因子A和GLUT4基因结合活性 怎么设计 谢谢

要知道自己要研究的转录因子的结合序列,之后按照结合序列的5'和3'端各加两个碱基(目的基因上的)就可以了。好像为了更稳定结合可以在两侧多加几个。
如果要设计突变的话就把突变点放在中间。
所知有限,希望能对你有所帮助

探针是一小段单链DNA或者RNA片段(大约是20到500bp),用于检测与其互补的核酸序列。双链DNA加热变性成为单链,随后用放射性同位素(通常用磷-32)、荧光染料或者酶(如辣根过氧化物酶)标记成为探针。磷-32通常被掺入组成DNA的四种核苷酸之一的磷酸基团中,而荧光染料和酶与核酸序列以共价键相连。
当将探针与样品杂交时,探针和与其互补的核酸(DNA或RNA)序列通过氢键紧密相连,随后,未被杂交的多余探针被洗去。最后,根据探针的种类,可进行放射自显影、荧光显微镜、酶联放大等方法来判断样品中是否,或者何位置含有被测序列(即与探针互补的序列)。