请问我的ELISA预实验该怎么实施?

来源:百度知道 编辑:UC知道 时间:2024/05/17 11:50:01
题目是药物A对大鼠心衰的治疗效果,实验对象是170只大鼠,大概过程是首先制作糖尿病大鼠心衰模型,再进行各种不同的处理,最后测指标。
分成6组:
1)正常对照组大鼠10只。
2)心力衰竭组大鼠10只。
3)药物A治疗组:分成3个亚组:大剂量组、中剂量组和小剂量组,每组各10只大鼠。
4)阳性对照组:ACEI组,10只大鼠。
5)阳性对照组:地高辛组,10只大鼠。

我要用ELISA试剂盒测大鼠血浆ET、vWF等指标,请问预实验应该怎么做?
第一次做实验好多问题,请各位老师帮帮我,谢谢!

1. 确定有进行ELISA实验最重要的仪器:
酶标仪;

2. 确定实验动物种属和ELISA检测指标:
查找文献,根据临床意义,确定要用的实验动物种属(如大鼠、小鼠、豚鼠、兔、猪、狗等)和用ELISA方法检测的实验指标(如白介素,生长因子,激素等);

3. 确定要搜集的标本类型:
如血清、抗凝血浆、肺泡灌洗液、脑脊液、尿液、关节华液、组织匀浆、细胞培养上清液等;

4. 确定要收集的标本数量:
用以确认需要采购检测试剂盒的数量;

5. 确定标本的处理方法:
根据所采购的检测试剂盒说明书,确定不同类型标本的正确处理方法;

6. 确定要收集的标本体积;
合理分组,根据实验模型,确定要收集的标本体积;

7. 确定购买试剂盒的厂家和试剂盒类别:
根据适用于要检测的标本的相应规格的ELISA试剂盒的灵敏度、检测范围、价格和到货期等情况来确定检测试剂盒的品牌厂家和类别;

8. 确定要购买的试剂盒的规格和数量:
根据标本数量,确定要购买的试剂盒的规格和数量,同时了解试剂盒的整盒有效期和拆开包装後的有效期(各主要成分的开瓶有效期),降低实验风险;

9. 确认实验复孔:
为了增加结果的可靠性,对标准曲线和标本,要求做双复孔或者三复孔,就是同一份标本,平行做两次或者三次。如果本身试剂盒的稳定性好,而又不要求每个数据的绝对准确,主要目的是为了统计学意义的话,可以选择做双复孔或者是单孔。

10. 确定时间的合理安排:
最主要确定标本的采集时间,根据采集时间来安排标本的保存条件、何时进行试剂盒的购买、如何进行预实验的安排、如何进行大批量标本的检测:如果标本采集时间过长,如超过六个月,请把标本放在-70度或者液氮罐中保存;在基本上收集完标本的前一个月,进行试剂订购。一般国外试剂的到货期最长一个月,有足够的时间来等待试剂盒的来到。到货